-
Происхождение:
-
человек, дермальные фибробласты (мезенхимные стволовые клетки) из кожи век 45-летнего донора
-
Автор:
-
ТА Крылова
-
Публикация:
-
Получение и характеристика неиммортализованных клеточных линий дермальных фибробластов человека, выделенных из кожи век взрослых доноров разного возраста Крылова Т.А. и др., Цитология 2016. 58 (11): 850-864
-
Морфология:
-
фибробластоподобная
-
Способ культивирования:
-
монослойный
-
Условия культивирования:
-
среда - DMEM/F12
сыворотка - эмбриональная бычья 10%
процедура пересева - cнятие клеток, используя трипсин 0.25%: версен 0.02% (1:3), кратность рассева 1:3, оптимальная плотность 4.0 – 5.0х104 клеток/см2
криоконсервация - ростовая среда, 10 % DMSO, 1.0-1.5х106 клеток/мл в ампуле
-
Жизнеспособность после криоконсервации:
-
85 % (окраска трипановым синим на нулевом пассаже)
-
Контроль контаминации:
-
бактерии, грибы и микоплазма не обнаружены
-
Контроль видовой идентичности:
-
кариологический анализ
-
Кариология:
-
2n= 46, модальное число хромосом 46 (98.0%), нормальный кариотип человека (46, XХ), количество полиплоидов 1.2%.
ДНК профиль (STR):
Amelogenin: Х, Х
CSF1PO: 10, 12
D13S317: 11, 11
D16S539: 11, 11
D5S818: 11, 13
D7S820: 13, 13
THO1: 6, 9
TPOX: 9, 9
vWA: 15, 17
-
Эффективность клонирования:
-
25
-
Другие характеристики:
-
Среднее время одного удвоения клеточной популяции 35.0ч; время активной (логарифмической) фазы роста на 6-м пассаже составляет 72ч.
Линия с ограниченным сроком жизни; фаза активного репликативного старения наступает на 25 пассаже, что соответствует более 50 удвоениям клеточной популяции.
Экспрессия поверхностных антигенов, характерных для мезенхимных стволовых клеток: CD44, CD73, CD90, CD105 и HLA-ABC; отсутствие экспрессии антигенов: CD34, CD45 и HLA-DR.
Направленная дифференцировка в адипогенном, остеогенном и хондрогенном направлениях.
-
Область применения:
-
клеточная биология, биотехнология
-
Коллекции:
-
Коллекция культур клеток позвоночных Института цитологии РАН