-
Происхождение:
-
человек, дермальные фибробласты (мезенхимные стволовые клетки) из кожи век 53-летнего донора женского пола.
-
Автор:
-
Крылова Т.А.
-
Публикация:
-
Получение и характеристика неиммортализованных клеточных линий дермальных фибробластов человека, выделенных из кожи век взрослых доноров разного возраста Крылова Т.А. и др., Цитология 2016. 58 (11): 850-864
-
Морфология:
-
фибробластоподобная
-
Способ культивирования:
-
монослойный
-
Условия культивирования:
-
среда - DMEM/F12
сыворотка - эмбриональная бычья 10%
процедура пересева - cнятие клеток, используя трипсин 0.25%: версен 0.02% (1:3), кратность рассева 1:3, оптимальная плотность 0.5 – 1.5х104 клеток/см2
криоконсервация - ростовая среда, 10 % DMSO, 1.0-1.5х106 клеток/мл в ампуле
-
Жизнеспособность после криоконсервации:
-
85 % (окраска трипановым синим на нулевом пассаже)
-
Контроль контаминации:
-
бактерии, грибы и микоплазма не обнаружены
-
Контроль видовой идентичности:
-
кариологический анализ
-
Кариология:
-
2n= 46, модальное число хромосом 46 (98.0 %), нормальный кариотип человека (46, XХ), при анализе 3-х независимых повторностей из одной клеточной популяции обнаружены неклональные структурные хромосомные перестройки (14.0 %), количество полиплоидов 0.8 %.
ДНК профиль (STR):
Amelogenin: X, X
CSF1PO: 11, 13
D13S317: 8, 12
D16S539: 11,12
D5S818: 12,13
D7S820: 11,12
THO1: 6, 8
TPOX: 8, 11
vWA: 15,16
-
Эффективность клонирования:
-
30
-
Другие характеристики:
-
Среднее время одного удвоения клеточной популяции 33.0 ч; время активной (логарифмической) фазы роста на 6-м пассаже составляет 48 ч.
Линия с ограниченным сроком жизни; вступление клеток в стадию репликативного старения начинается на 25 пассаже, т.е. после 50 удвоений клеточной популяции.
Экспрессия поверхностных антигенов, характерных для мезенхимных стволовых клеток: CD44, CD73, CD90, CD105 и HLA-ABC; отсутствие экспрессии антигенов: CD34, CD45 и HLA-DR.
Направленная дифференцировка в адипогенном, остеогенном и хондрогенном направлениях.
-
Область применения:
-
клеточная биология, биотехнология.
-
Коллекции:
-
ИНЦ РАН