-
Происхождение:
-
человек, мезенхимные стволовые клетки из крайней плоти ребенка 2.5 лет
-
Автор:
-
ТА Крылова
-
Публикация:
-
Получение и сравнительная характеристика линий мезенхимных стволовых клеток, выделенных из крайней плоти двух доноров одного возраста. Крылова Т. А., и др., Цитология. 60 (4): 262–272 | doi:10.31116/tsitol.2018.04.04
-
Морфология:
-
фибробластоподобная
-
Способ культивирования:
-
монослойный
-
Условия культивирования:
-
среда - IMDM
сыворотка - эмбриональная бычья 10%
процедура пересева - cнятие клеток, используя трипсин 0.25%: версен 0.02% (1:3), кратность рассева 1:3 – 1:4, оптимальная плотность 2.0 – 4.0х104 клеток/см2
криоконсервация - ростовая среда, 5% DMSO, 1.0 - 1.5х106 клеток/мл в ампуле
-
Жизнеспособность после криоконсервации:
-
90% (окраска трипановым синим на нулевом пассаже)
-
Контроль контаминации:
-
бактерии, грибы и микоплазма не обнаружены
-
Контроль видовой идентичности:
-
кариологический анализ
-
Кариология:
-
2n= 46, модальное число хромосом 46 (98.0 ± 1.4 %), нормальный кариотип человека (46, XY), количество полиплоидов 6.4 %.
ДНК профиль (STR):
Amelogenin: X, Y
CSF1PO: 11, 11
D13S317: 9, 11
D16S539: 11, 11
D5S818: 12, 13
D7S820: 10, 12
THO1: 9, 9.3
TPOX: 11, 11
vWA: 13, 16
-
Эффективность клонирования:
-
25
-
Другие характеристики:
-
Среднее время одного удвоения клеточной популяции 36.9 ч; время активной (логарифмической) фазы роста на 6-м пассаже составляет 96 ч.
Линия с ограниченным сроком жизни; до 50 удвоений клеточной популяции не наблюдается снижения пролиферативной активности; фаза активного репликативного старения наступает на 26 пассаже, что соответствует более 60 удвоениям клеточной популяции.
Экспрессия поверхностных антигенов, характерных для мезенхимных стволовых клеток: CD44, CD73, CD90, CD105 и HLA-ABC; отсутствие экспрессии антигенов CD34, CD45 и HLA-DR.
Направленная дифференцировка в адипогенном, остеогенном и хондрогенном направлениях.
-
Область применения:
-
клеточная биология, биотехнология
-
Коллекции:
-
ИНЦ РАН