человек, пульпа зуба девочки 6-ти лет (мезенхимные стволовые клетки).
среда - DMEM/F12.
сыворотка - эмбриональная бычья 10%.
процедура пересева - cнятие клеток,
используя трипсин 0.025% раствор трипсин-ЭДТА,
кратность рассева 1:2 - 1:3, оптимальная плотность – 4.0-5.0х103
клеток/см2.
криоконсервация - ростовая среда, 10% DMSO, 1.0х106
клеток/мл в ампуле.
87% (окраска трипановым синим на нулевом пассаже)
2n=46, модальное число хромосом 46 (98.0 ± 1.4 %), нормальный
кариотип человека (46, XХ), количество полиплоидов 6.0 ± 0.8% .
ДНК профиль (STR):
Amelogenin: X,X
CSF1PO: 10, 11
D13S317: 10, 10
D16S539: 11, 12
D5S818: 12, 13
D7S820: 11, 12
ТHO1: 9.3, 9.3
TPOX: 8, 11
vWA: 17, 19
линия с ограниченным сроком жизни; на 6-м пассаже среднее время одного удвоения клеточной популяции 37.5±2.2ч. Время активной (логарифмической) фазы роста составляет 72 ч. Стадия активного репликативного старения наступает на 16-м пассаже.
Экспрессия поверхностных антигенов, характерных для мезенхимных стволовых
клеток: CD44, CD73, CD90, CD105, HLA-ABC; отсутствие экспрессии
антигенов CD34, CD45 и HLA-DR.
Направленная дифференцировка в остеогенном и хондрогенном направлениях на раннем и поздних пассажах; сниженный характер адипогенной дифференцировки на раннем 6-ом пассаже; отсутствие адипогенной дифференцировки на позднем 18-м пассаже.