SC5

SC5

Описание

SC5
Происхождение: человек, эмбриональные стволовые клетки (ЭСК), бластоциста (5-6 день развития), полученные в результате ЭКО
Science. 1998. 282: 1145 – 1147; Онтогенез. 2011. 42 (4): 249 – 263; Цитология. 2012. 54 (1): 5 – 16.
Морфология: колонии округлых клеток с высоким ядерно/цитопламатическим отношением.
Способ культивирования: монослойный; колонии прикреплены к митотически инактивированному (митомицин-С) фидерному слою мезенхимных клеток костного мозга эмбриона человека.
Условия культивирования: среда - Knockout Dulbecco’s modified Eagles medium
сыворотка - Knockout Serum Replacement 20%
др. компоненты - NEAA 1%, L-глютамин 2mM, 2- меркаптоэтанол 0.1 mM, bFGF - 8 нг/мл
процедура пересева - механический пересев культуры ЭСК под контролем микроскопа путем разделения колонии на фрагменты с помощью одноразового скальпеля и переноса их на новый слой фидера; ежедневная смена среды, пересев каждые 5-6 дней.
криоконсервация - ростовая среда, 10% DMSO, 5х105 клеток/мл в ампуле
Жизнеспособность после криоконсервации: 60 % (окраска трипановым синим на нулевом пассаже)
Контроль контаминации: бактерии, грибы и микоплазма не обнаружены.
Контроль видовой идентичности: кариологический анализ.
Кариология: 2n= 46, модальное число хромосом 46 (98.0±0.9 %), нормальный кариотип человека (46, XХ), количество полиплоидов (0.2 ±0.2%).
ДНК профиль (STR): Amelogenin: X, Х
CSF1PO: 12, 13
D13S317: 8, 11
D16S539: 9, 12
D5S818: 9, 11
D7S820: 8, 10, 12
THO1: 6, 9.3
TPOX: 10, 11
vWA: 17, 17
Другие характеристики: среднее время одного удвоения клеточной популяции 28.2 ч. Линия иммортализованная, прошла более 120 удвоение клеточной популяции.
Экспрессия поверхностных антигенов, характерных для ЭСК человека: SSEA-4, TRA-1-60 и транскрипционных факторов Осt-4, Nanog.
Способность к спонтанной дифференцировке в производные 3-х зародышевых листков.
Способность к образованию in vivo тератом, содержащих производные 3-х зародышевых листков.
Область применения: клеточная биология, эмбриология.
Коллекции: КККП ИНЦ РАН.

Характеристики

Автор:
АМ Кольцова
Публикация:
Сравнительные характеристики новых линий эмбриональных стволовых клеток человека SC5, SC6, SC7 и SC3a., Кольцова Ам и др., Онтогенез. 2011. 42 (4): 249 – 263
Видовая принадлежность:
Человек (Homo sapiens)